当离心机制备的提副业是凹状梯度时，与凸状梯度相反，先从混合室里流到离心管的是重端梯度液，制备时，轻液要缓慢的铺上，因而要求针头以相应的速度抬起，但在多数情况下，只是简单的将离心管斜放一定角度，将针头烤放于离心管口，使溶液沿管壁缓缓流下，逐步铺上，加完后，再把离心管垂直放好加样。此时应注意的是，所选用离心管的材料*好是亲水性的，如是憎水性离心管，可用一些盐，这样再加入梯度溶液时，可保证均匀的流下。

　　为了密度梯度和样品区带的稳定，加到密度梯度液柱顶部样品的密度必须小于梯度液顶部的密度，如果不是这样，样品将以塌陷的方式通过梯度，直到到达等密度区。离心机厂在这个过程中样品层将明显的扩展，缠上的小滴沉降会造成区带分辨力下降。

　　离心机分离技术的形式有离心沉降、离心过滤、离心分离和离心分析等。

　　1、离心沉降：依据不同大小和密度的颗粒在离心力场中沉降速度的不同进行分离。

　　2、离心过滤：辅以滤材，利用离心力进行分离。

　　3、离心分离：借助梯度介质，利用离心力分离密度和沉降系数不同的颗粒。

　　4、离心分析：采用特殊的转子和检测手段，测定颗粒的密度、分子量和沉降系数等物理参数。

　　一、离心机梯度介质的选用：

　　1、盐梯度介质。

　　2、小分子有机物如蔗糖。

　　3、三碘化苯衍生物。

　　4、有机高聚物。

　　5、胶态二氧化硅。

　　二、离心机梯度的密度范围：

　　1、速率区带离心的介质密度小于样品中各种颗粒的密度。

　　2、等密度区带离心的介质密度大于样品中各种颗粒的密度。

　　三、离心机梯度的容量：

　　指在达到分离要求的前提下，梯度介质容纳样品的大数量。

　　1、与样品组成和分离要求有关。

　　2、与梯度总体积、斜率和介质粘度有关。

　　3、与转速和转子形式有关。

　　以冷冻离心机的梯度介质为例，可以归结为一下特点,梯度介质应该是惰性的，至少对被分离颗粒没有毒性。应知道梯度介质的理化特性，能够利用这些特性中的一种或多种特性（如折射率）测定梯度介质的浓度。梯度介质要能够把悬浮液中的颗粒定量的分离出来，即要求用它所配置的梯度柱要有确定的密度范围。在给定的密度范围内，梯度介质对渗透压敏感的颗粒应该是等渗的。梯度介质应能调到与被分离颗粒生理状态一致的PH值和离子强度，并且不管介质浓度如何变化，PH值和离子强度都保持不变，也不会发生水合作用。在给定的密度范围内，梯度介质的粘度应尽可能低。梯度介质不会干扰分级分离时样品区带的监测。

　　离心机梯度介质应该很方便的从分离的颗粒中除去，并且不损失样品的活性。能够消毒，并且分离特性不变，不腐蚀所用的离心管、转子和各种量器。所用的梯度材料应该是纯的物质，价格便宜，贵重材料使用后便于回收再利用。